我公司提供多种sgRNA活性检测方法，包括SSA luciferase报告系统、Surveyor法、Q-PCR、突变点基因测序等

• SSA检测：根据客户要求检测sgRNA的活性及敲除效率，客户也可以选购我公司Precut pSG-target Cloning kit自行构建报告载体用于检测，我公司提供阳性及阴性sgRNA及其SSA report target质粒。

• 检测原理：SSA报告质粒(pSG-target)中luciferase基因被终止密码子提前终止，这种截短的luciferase没有活性。为检测sgRNA的剪切活性，将Cas9/sgRNA的靶点序列插入到终止密码子之后。在Cas9和sgRNA的作用下，靶点位置的序列被有效剪切形成DSB，细胞通过同源重组重新形成有活性的luciferase（Figure 1），通过检测luciferase的活性升高就可以反应Cas9/sgRNA的剪切活性（Figure 2）

。

Figure 1. Restore disrupted luciferase function via sgRNA-mediated homologous recombination

Figure 2.Increased FL/RL ratio in Cas9/sgRNA transfection cells.

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